针对此问题，热线专家表示，理论上，培养料所有部位温度都达到100℃后维持4-6小时，可以杀灭培养料中的各种杂菌。但在实际操作中，由于加温方法和炉灶结构的关系，锅的中心与边缘及死角的温度并不一致，一般生产者无法测出各部位培养料都达到100℃的确切时间，所以为保证杀灭培养料内的有害病菌，往往需延长灭菌保温时间。一般中心温度达到100℃后，维持8-12小时后即可以停火保温，待温度降至稍高于常温，可取出冷却。由于锅中的水和料袋的温度上升至100℃需要时间，灭菌后料袋温度冷却至手能拿出也需要时间，所以从开始加温到料袋取出一般实际需要24-32小时。另外由于锅的外形和大小、锅外壁的保温性能、锅中装袋间隙和袋中培养料的松紧度都各不相同，所以在大批量生产前一定要以成品率的高低为标准适当作调整，最终确定升温、100℃保温和维持降温总共所需的时间，有时甚至要超过32小时。

　　目前国内农户生产菌种大多无恒温空气过滤系统，因此母种扩繁母种、母种扩繁原种的操作过程一般在接种箱中进行。由于从母种扩繁到栽培种的扩繁系数高达200多倍，从原种扩繁到栽培种的扩繁系数也有50多倍，因此即使只有一支试管母种或一瓶原种染杂菌没检出，也会导致大批栽培种染杂，所以在母种和原种的扩繁过程中，一定要严格消毒灭菌。目前在接种箱内消毒灭菌，效果较好的方法是50%甲醛+高锰酸钾烟雾消毒法，即按接种箱每1立方米的空间取5克高锰酸钾，放在一容器中，在接种前放入接种箱，然后注入10毫升50%的甲醛，立即关闭箱门，几秒种后，在高锰酸钾的作用下，甲醛溶液即开始沸腾挥发，待雾气散尽后10-15分钟就可接种。接种时不要开电扇、门窗，减少室内空气流通，防止室内空气中的杂菌孢子进入箱内。接种操作要在火焰上方进行，以确保无菌环境。在生产较大数量的栽培种时，由于接种箱内接种工序繁琐，费时费工，且甲醛的刺激味浓，所以不少人在室内采用气雾消毒剂消毒灭菌，进行开放式接种。

　　使用接种箱接种还应注意接种箱的保养和维护，接种箱要密封不漏气，平时要保持干燥，工作完毕后要及时清除箱内废弃物，用 1%-2%来苏儿擦洗内壁和用具，再用5%石碳酸全面喷雾后关闭，箱口或套袖要定期清洗和更换。上海三农服务热线供稿